梯度洗脱

weimushui

第8章   梯度洗脱
- P9 S+ t' O& a- Q8-1引言4 E( y4 W8 V( K! e
        如前所述，等度分离在洗脱全过程中流动相组成不变（例如50%甲醇-水），而在梯度洗脱中流动相组成随运行过程是变化的（例如5→100%甲醇-水）。梯度洗脱中一般采用二元（溶剂）流动相：A与B，其中强溶剂B的浓度（%B）在运行过程中逐渐增加。图8-1所示为几种不同类型的梯度变化，其中线性梯度最为常用。除另有说明，本书中均假设为线性梯度。图8-1所示为流动相组成在20 min内，B浓度由0增大为100%（线性梯度，5%/min）。
$ j3 V8 C8 B1 b3 |1 j1 m. M' n        许多样品用梯度洗脱会分离更好，但许多实验室却对梯度洗脱的应用存在很大偏见。其原因有如下几点：
- P7 a% e# Y6 l* _, k+ _9 V/ ~        1、有些实验室尚不具备梯度洗脱设备。
, L" R4 C0 N7 m, k        2、梯度洗脱更复杂，似乎更难进行新方法建立与常规分析。
( J* w; @3 a- p3 r6 C        3、某些HPLC检测器（如示差折光检测器）不能使用梯度洗脱。& F! @3 \' @  `- o# w
        4、每次运行梯度洗脱后需重新平衡色谱柱，耗时较长。
& G) _0 O, C' r% u6 i/ ^        5、不同设备的分离结果可能不同，所以梯度洗脱法移植时会出现差异。; L; g3 p# n& k4 P" [4 Z) G$ o
        6、梯度洗脱中的基线问题更为普遍，并且必须使用高纯溶剂。
1 o* E  z7 m; y' ]( ^7、某些色谱柱╱流动相的联合应用不适于梯度洗脱。

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